CellCelector標(biāo)準(zhǔn)實驗工作流程最多分為五個步驟:
1.在明場、相差和/或熒光通道中掃描源細胞培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿
2.根據(jù)用戶定義的標(biāo)準(zhǔn)分析采集的圖像并檢測相關(guān)細胞或克隆
3.由操作人員對分析結(jié)果進行分類、排序和確認
4.挑取檢測到的單細胞和克隆
5.記錄和導(dǎo)出結(jié)果(圖像、數(shù)據(jù))
關(guān)鍵工作流程
掃描
顯微鏡和相機完全由 CellCelector 軟件控制,可定制包含所有成像參數(shù)的成像配置,只需簡單點擊即可輕松更換成像設(shè)置。根據(jù)應(yīng)用要求,可在明場、相差或5個熒光通道(多達 14 種顏色)之間進行掃描。每次掃描均根據(jù)預(yù)定的設(shè)置進行,以保證成功識別、檢測細胞和克隆。
分析和檢測
每次掃描均會自動分析,以便根據(jù)預(yù)先定義的用戶參數(shù)(如灰度值、熒光強度和廣泛的形態(tài)測量值)檢測相關(guān)的靶細胞。預(yù)覽模式下可對每個檢測數(shù)據(jù)和當(dāng)前分析設(shè)置的質(zhì)量進行簡單的審查。
篩選和確認
分析結(jié)果會生成含所有檢測對象的列表(包含其對應(yīng)的參數(shù)值),可通過應(yīng)用額外的數(shù)值過濾器、設(shè)門、對靶細胞進行排序或?qū)彶閳D像庫中檢測到的細胞圖像來對檢測結(jié)果進行確認。檢測到的靶細胞在各種模式下均可瀏覽,比如在相應(yīng)的檢測通道的圖像庫或者在預(yù)覽圖像庫中都可以追蹤到,從而快速可視化以確定挑取清單。
挑取
CellCelector Flex 軟件允許用戶訪問多種挑取參數(shù)。可以單獨調(diào)整這些參數(shù)以優(yōu)化挑取結(jié)果,使系統(tǒng)不僅可以從標(biāo)準(zhǔn)的細胞培養(yǎng)容器中挑取,還可以從膜、過濾器或顯微鏡載玻片中挑取。
記錄
從成像到挑取的整個工作流程都進行了完整記錄并符合GLP 和 GMP 標(biāo)準(zhǔn)。該軟件在每次挑取前后都會自動保存高質(zhì)量的顯微圖像,以便后續(xù)審查包括明場、任何熒光通道中的挑取結(jié)果。每一個被檢測/捕獲的對象都可以通過其唯一的 ID 進行識別,并可以在整個過程中進行從源板到終板完整的跟蹤。所有圖像和數(shù)據(jù)均可輕松導(dǎo)出用于記錄或存檔,或?qū)?LIM 系統(tǒng)。
CellCelector關(guān)鍵特征
多功能
| 適用于貼壁細胞、懸浮細胞或半固體培養(yǎng)基中的細胞; 單細胞、細胞團、球體或菌落; 原代細胞或細胞系; 活細胞或固定細胞 |
靈活
| 明場、相差和熒光成像; 自動、半自動或手動細胞篩選,以供挑取分離; 兼容標(biāo)準(zhǔn)或定制源容器和目標(biāo)容器,如微孔板、培養(yǎng)皿、載玻片、過濾器、芯片、PCR 板或管; 可升級的定制解決方案,可整合至大平臺 |
可靠
| 對特定細胞亞群超過95%的挑取準(zhǔn)確性; 對移動的檢查對象進行自動重新定位; 如果挑取失敗,可重新挑取; 軟件自動檢測是否成功挑取 |
溫和挑取
| 不影響細胞特性; 可分離準(zhǔn)備用于分子表征或下游培養(yǎng)的純完整細胞; 挑取后的細胞完整性和存活率高(包括單細胞克隆應(yīng)用中高達 95% 及以上的存活率) |
快速 | 實驗操作時間短; 每次挑取僅 20 至 30 秒 |
上游l下游兼容
| 無需復(fù)雜的樣本制備,無需昂貴的耗材; 與多個上游富集技術(shù)(免疫磁珠富集、基于尺寸的分離等)兼容; 抽吸和點樣體積小(降至約 10 nL); 單細胞 PCR、NGS、RNA-Seg、細胞克隆、滴度分析、放大工藝等 |
記錄
| 符合 GLP 和 GMP 標(biāo)準(zhǔn)的完整工作流程記錄; 通過在每次挑取事件前后拍攝的實時、高質(zhì)量圖像進行質(zhì)量控制; 每一個被檢測/捕獲的對象都可以通過其唯一的 ID 進行識別,并可以在整個過程中從源板到終板進行完整的追蹤,方便導(dǎo)出所有捕獲的圖像和數(shù)據(jù) |
CellCelector關(guān)鍵應(yīng)用方向